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是建立一支由中共直接領導的有戰鬥力的武裝隊伍，成為武裝起義的主力。他們組織了糾察隊2300人，赤衛隊800多人，特別隊數百人。周恩來親自到各訓練地點作政治報告成進行軍事訓練。

上海工人第三次武裝起義在1927年的3月21日發動了，整個行動，由特委會議指揮，緊急時由羅亦農、周恩來、何松林（汪壽華）、陳獨秀捐揮。周恩來分工在南市指揮，後來又到閘北前線。他身穿灰布棉袍，頭戴鴨舌帽，在總指揮部對著地圖同趙世炎邊商量，邊決定，聽取報告，指示行動。經過28小時戰鬥，攻下北洋軍閥在上海的最後一個據點——北火車站。起義取得了勝利，完全是靠有織織的產業工人武裝作戰，打敗了幾千反動軍警。這是中國工人階級依靠自己的力量武裝起義勝利的光輝一頁。

工人起義勝利了，蔣介石等率北伐軍進入了上海市，卻準備著對起義的工人階級下毒手。4月11日夜到12日凌晨，他們用陰謀詭計繳了工人糾察隊的械，13日，開始了瘋狂的屠殺和搜捕。昔日的盟友徹底地露出了反動面目，是一個狠毒兇殘的劊子手。大批共產黨員和工人群眾倒在血泊中，中國共產黨的組織被迫轉入地下。周恩來起草了電報，與趙世炎、羅亦農、陳延年、李立三、尹寬聯名致中共中央，主張迅速出師討伐蔣介石。電報中分析了軍事力量對比，認為蔣介石處於不利地位。“為全域性計，政治不宜再緩和妥協”。但這一建議未為蘇聯顧問鮑羅廷和陳獨秀所採納。

1927年5月下旬，周恩來由上海秘密到達中共中央所在地武漢。此前，在漢口召開的中共第五次全國代表大會上，周恩來被選為中央委員；在五屆一中全會上，又被選為中央政治局委員。25日，中央政治局常委會議決定周恩來任中共中央軍事部部長，必要時參加常委會議。29日，中央政治局常委會議決定周恩來代理中央常委職務，參加中央核心領導。從此以後，在長達半個世紀的時間內，周恩來一直是中共中央的主要領導人之一。

周恩來領導軍事部後，以聶榮臻、王一飛、顏昌頤、歐陽欽等為助手，進行了對軍隊的組織、聯絡，加強了軍隊的政治工作，向國民革命軍中派去朱德、陳毅、劉伯承等不少幹部，並負責指導武漢的工人糾察隊和湖南、廣東的農民運動。這時，國民革命軍獨立第十四師師長夏鬥寅在宜昌發動的武裝叛變雖已擊退，長沙許克祥又發動了反革命的“馬日事變”，武漢汪精衛叛變革命的跡象越來越明顯，周恩來主張在農民運動力量強大的湖南農村發動武裝起義。6月17日，他在中共中央常委會上提出，現在湖南18縣有8000枝槍，可以派人去集中起來，攻取反動力量弱的城池，計劃取湘潭，集中瀏陽、平江，省委下設軍委，各區設農軍委員會，在可能範圍內成立鄉村的臨時委員會，對許多反動軍隊強則擾之，弱則繳其械。會議同意了這一佈置。20日，周恩來在中共中央常委會上又說：湖南省委決定派50人回去，把湖南劃為10個區，派10名懂軍事的幹部去，作好準備，根據政治局決定進行暴動。但這些意見遭到共產國際代表的反對，沒有實現，陳獨秀在7月5日的中央常委會上甚至說：軍事工作應該收縮。

7月15日，汪精衛背叛孫中山的國共合作政策。他同蔣介石一樣，對共產黨員和革命群眾進行大屠殺。

中國共產黨決定舉行南昌起義。

南昌起義的建議最早是誰提出來的？是周恩來。周恩來講過這個過程，南昌起義的提出是這樣的：“那時，軍委想可否搞個起義，主要是鮑羅廷跟加倫說可以搞個起義，國際決定上沒有。”而周恩來當時正是軍委領導人。這時間是在7月中旬。根據這個考慮，周恩來向在軍委工作的幾個同志佈置，指定賀昌、顏昌頤、聶榮臻組成前敵軍委，聶榮臻為書記，任務是先到九江去，通知同志們瞭解這個意圖，作為起義的準備。什麼時候發難，要聽中央的命令。

7月26日，周恩來由陳賡陪同到九江，27日到南昌。當時，中共臨時中央常委會議已經正式決定，成立由周恩來、李立三、惲代英、彭湃組成的中共前敵委員會，周恩來為前委書記，用國民黨革命委員會的名義在南昌舉行武裝起義。

8月1日凌晨，周恩來和賀龍、葉挺、朱德、劉伯承等領導在中國共產黨掌握和影響下的國民革命軍2萬餘人舉行起義。經過幾個小時的激烈戰鬥，全殲駐南昌國民黨軍3000餘人，於拂曉佔領南昌。

南昌起義開始了中國共產黨獨立地領導革命武裝鬥爭和建立人民革命軍隊的新時期。從此，8月1日成為中國